Ταξινόμηση των συνενζύμων που είναι συγκεχυμένα

Συνένζυμα, συμπαράγοντες και ενεργοποιητές
Σύμφωνα με τις απαιτήσεις των βέλτιστων συνθηκών για αντιδράσεις που καταλύονται από ένζυμα, θα πρέπει κατ' αρχήν να προστεθεί μια ορισμένη ποσότητα βοηθητικών παραγόντων στο σύστημα ενζυμικής δοκιμασίας. Οι συμπαράγοντες αναφέρονται σε μη πρωτεϊνικά συστατικά που απαιτούνται για την ενζυμική δραστηριότητα, συμπεριλαμβανομένων των συνενζύμων, των συμπαραγόντων και των ενεργοποιητών μεταλλικών ιόντων. Οι συμπαράγοντες που συνδέονται στενά με τα ένζυμα ονομάζονται συμπαράγοντες. Οι ενζυμικές πρωτεΐνες χωρίς συμπαράγοντες ονομάζονται αποζύμες, οι οποίες στερούνται καταλυτικής δράσης και απαιτούν την προσθήκη επαρκών συμπαραγόντων για να σχηματίσουν ολοένζυμα. Μετά από επώαση με τον συμπαράγοντα για ένα χρονικό διάστημα, η ενζυμική δραστηριότητα θα ανακάμψει. Ως εκ τούτου, είναι συχνά απαραίτητο να προεπωάζεται ο συμπαράγοντας στο δείγμα και στο αντιδραστήριο. Η ποσότητα της βοηθητικής βάσης που χρησιμοποιείται είναι συχνά σχετικά μικρή.
Τα συνένζυμα, τα οποία συνδέονται χαλαρά με τις ενζυμικές πρωτεΐνες και μπορούν εύκολα να διαχωριστούν από τα ένζυμα μέσω της αιμοκάθαρσης και άλλων μεθόδων, ονομάζονται συνένζυμα. Αν και τα συνένζυμα διαφέρουν από τα ενζυμικά υποστρώματα, δρουν παρόμοια με τα υποστρώματα, δεσμεύονται, διαχωρίζονται και ανακυκλώνονται με ένζυμα κατά τη διάρκεια των ενζυματικών αντιδράσεων. Ο προσδιορισμός της δοσολογίας των συνενζύμων μπορεί να γίνει με την επεξεργασία τους ως υποστρώματα. Για παράδειγμα, τα συνένζυμα στη γαλακτική αφυδρογονάση υπολογίζονται σύμφωνα με την κινητική εξίσωση διπλού υποστρώματος.
Η χημική ουσία ενός ενεργοποιητή είναι ένα μεταλλικό ιόν, το οποίο μπορεί να είναι το ενεργό κέντρο ενός ενζύμου ή να ενεργοποιήσει τη δραστηριότητά του μέσω άλλων μηχανισμών. Ως ενεργοποιητές, τα μεταλλικά ιόντα έχουν πιο πολύπλοκο αντίκτυπο στην κινητική των ενζυματικών αντιδράσεων. Τα πιο κοινά είναι ιόντα δισθενών μετάλλων όπως Mg2+, Zn2+, Mn2+, Ca2+, Fe2+ κ.λπ. Τα περισσότερα ιόντα βαρέων μετάλλων είναι μετουσιωτικοί παράγοντες για ένζυμα. Τα μεταλλικά ιόντα συχνά παρουσιάζουν αμοιβαίο ανταγωνισμό ή αναστολή. Το EDTA προστίθεται συχνά σε συστήματα ενζυμικής δοκιμασίας για τη χηλικοποίηση ορισμένων μη βασικών ιόντων. Είναι απαραίτητη μια κατάλληλη συγκέντρωση μεταλλικών ιόντων, καθώς τα υπερβολικά ιόντα συχνά αναστέλλουν τον ρυθμό των ενζυμικών αντιδράσεων. Λόγω του γεγονότος ότι οι κινητικές των ενεργοποιητών είναι συχνά διαφορετικές από αυτές των ενζύμων, αυτό μπορεί να εξηγήσει τις διαφορετικές αναλογίες δειγμάτων προς διαλύματα αντίδρασης, με αποτέλεσμα δυσανάλογα αποτελέσματα μέτρησης της ενζυμικής δραστηριότητας. Η επίδραση ενεργοποίησης της Ν-ακετυλοκυστεΐνης στην κινάση της κρεατίνης είναι παρόμοια. Η δόση του ενεργοποιητή γενικά προσδιορίζεται μέσω επαναλαμβανόμενων πειραμάτων.